O cultivo da soja em regiões semiáridas representa um desafio, impulsionando a busca por estratégias capazes de atenuar os efeitos do estresse hídrico. O Brasil destaca-se como o maior produtor de soja no mundo, e parte do sucesso dessa produção está associada a Fixação Biológica de Nitrogênio (FBN), processo estabelecido pela associação entre bactérias do gênero Bradyrhizobium e plantas leguminosas. Nesse contexto, o objetivo deste estudo foi avaliar a eficiência de estirpes de Bradyrhizobium brasilense nativas do semiárido brasileiro na mitigação de efeitos do déficit hídrico na soja. O estudo foi conduzido em casa de vegetação, em delineamento em blocos casualizados, com esquema fatorial 6 × 2, composto por seis fontes de nitrogênio [três estirpes de B. brasilense (UFLA 06-19, UFLA 06-21 e UFLA 06-22), um inoculante comercial (SEMIA5079 B. japonicum + SEMIA5080 B. diazoefficiens) e dois controles sem inoculante, um com nitrogênio (N) mineral e outro sem aplicação de N] e dois níveis hídricos [controle (60% da capacidade de vaso - CV) e déficit hídrico (45% CV)]. O déficit hídrico afetou negativamente parâmetros fisiológicos (condutância estomática, concentração interna de CO2, fotossíntese líquida e eficiência instantânea de uso da água), crescimento (parâmetros morfométricos e produção de biomassa) e acúmulo de nitrogênio das plantas. Sob déficit hídrico, as plantas inoculadas com as estirpes de B. brasilense ou adubadas com N mineral apresentaram menores danos nos parâmetros fisiológicos que àquelas inoculadas com o inoculante comercial. Além disso, plantas estressadas e inoculadas com B. brasilense apresentaram maior eficiência instantânea de uso da água, atividade da enzima nitrato redutase, área foliar, atividade das enzimas peroxidase do guaiacol e dismutase do superóxido e acúmulo de nitrogênio em relação aos demais tratamentos. Os resultados evidenciam o potencial das estirpes UFLA 06-19, UFLA 06-21 e UFLA 06-22 para uso como inoculantes na cultura da soja em regiões semiáridas, emergindo com estratégia para cultivo de plantas sob restrição hídrica.